PARP通过CXCL1募集中性粒细胞促进热缺血供肝肝移植术后肿瘤复发

【作者】 王帅； 施晓雷； 马虎成； 韩冰； 丁义涛；

【机构】 南京大学医学院附属鼓楼医院；

【摘要】 目的和背景:探讨聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)对热缺血损伤供肝肝移植术后肝内中性粒细胞募集的调控以及对肿瘤复发情况的影响。材料与方法:建立C57BL/6小鼠热缺血再灌注(IR)损伤模型,在缺血处理前前经脾脏注射GFP标记的肝癌细胞CBRH-7919 (5X10^5/ml) 400ul,随机数字表法分为4组,每组15只:对照组:小鼠假手术处理后尾静脉注射生理盐水(1ml/kg);PJ34组:小鼠假手术处理后尾静脉注射PARP抑制剂PJ34 (3mg/kg);缺血组:小鼠肝门夹闭30min,肝门开放后尾静脉注射生理盐水(1ml/kg);PJ34+缺血组:小鼠肝门夹闭30min,肝门开放后尾静脉注射PJ34(3mg/kg)。各组术后6h处死取肝。观察指标为肝脏肿瘤细胞定植情况、炎症因子变化、炎症细胞募集情况。结果:术后6h,取小鼠肝脏制备单细胞悬液,流式检测GFP阳性肝癌细胞定植情况。对照组、PJ34组、缺血组、PJ34+缺血组的肿瘤细胞定植比例存在差异(0.039±0.01%,0.037±0.02%,0.389±0.08%,0.253±0.02%,p<0.05)。蛋白芯片检测肝内趋化因子变化水平,发现CXCL1变化幅度最大(1.000±0.021,1.844±0.140,4.292±0.469,3.353±0.387,p<0.01)。作为免疫细胞的强趋化因子,CXCL1高表达对中性粒细胞产生明显趋化作用,其中肝内中性粒细胞在缺血组募集水平最高,阻断CXCL1或者抑制PARP后肝内中性粒细胞水平降低。αLy6G耗竭小鼠中性粒细胞后,热缺血损伤对肿瘤细胞肝内募集的作用消失。结论:热缺血供肝肝移植术后肝内PARP水平升高,CXCL1表达上调,引起中性粒细胞募集增多,促进肿瘤细胞肝内定植。PARP/CXCL1/中性粒细胞轴是促进肿瘤复发的潜在机制。抑制PARP可以显著减少热缺血供肝肝移植术后肿瘤复发水平,其可能机制与PJ34抑制肝内CXCL1表达有关。更多还原