中华绒螯蟹(Eriocheir sinesis)BMP7及其受体BMPRI和BMPRII的克隆及其在精子发生过程中表达初探

【作者】 王高远； 徐亚茹； 周一超； 杨万喜；

【机构】 浙江大学生命科学学院精子实验室；

【摘要】 精原细胞的有丝分裂及其精确调控,对保证足够数目的精子和维持雄性育性至关重要。然而,目前关于中华绒螯蟹(Eriocheir sinesis)精子发生机制及精原细胞有丝分裂的调控机制尚不清楚。骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein,BMP7)属于转化生长因子-β(transforminggrowth factor,TGF-β)超基因家族,与其I型受体(BMPRI)和II型受体(BMPRII)结合引起下游信号通路调控各项生理活动。本研究旨在探究BMP7及其受体在中华绒螯蟹精子发生过程中的重要性以及对精原细胞有丝分裂的调控作用。本实验通过兼并PCR和RACE技术得到BMP7、BMPRI、BMPRII蛋白的基因全长。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析发现,BMP7、BMPRI、BMPRII在各个组织中均有表达,其中BMP7在心脏肝胰腺中表达较多,BMPRI在心脏和鳃中表达较多,BMPR II在肠、心脏和鳃中表达较多。三种基因在精巢中都有表达,暗示其在精巢中发挥一定功能。为探究其在精子发生过程中mRNA的时空表达,在组织水平进行了荧光原位杂交实验。结果表明bmp7 mRNA在精原细胞和精母细胞有较高表达,主要分布在细胞质中。随着精子形成,bmp7信号减弱,在成熟精子中信号消失,表明其在生精细胞有丝分裂过程中的重要作用。本研究初步探究了BMP7与其受体在中华绒螯蟹精子发生过程中的表达,为今后研究BMP7通路在中华绒螯蟹精子发生及生精细胞有丝分裂过程中的功能提供基础。更多还原