中药单体柚皮苷对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的机制研究

【作者】 苑珍珍； 杨召； 金鸿宾； 许海委； 范桐顺； 田鹏； 李远栋；

【机构】 天津中医药大学； 天津市天津医院； 天津中医药大学第一附属医院；

【摘要】 目的观察中药补碎骨单体柚皮苷(Naringin)对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的影响,为其治疗椎间盘退变提供理论依据。方法对体外培养的入退变椎间盘髓核细胞利用甲苯胺蓝和番红0染色进行鉴定,并对P3代细胞分别用柚皮苷0μg/ml(对照组)、柚皮苷10μg/ml、柚皮苷20μg/ml、柚皮苷40μg/ml、柚皮苷80μg/ml、柚皮苷100μg/ml的培养基培养人髓核细胞48小时,CCK-8法选择其抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡的最佳浓度。qRT-PCR检测Fas、FasL、Caspase-8基因表达。Elisa法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达。结果细胞染色结果均为阳性,证明实验所中所培养的细胞为髓核类软骨细胞。CCK-8法测定20μg/ml柚皮苷为抑制髓核细胞凋亡的最佳浓度(P<0.05)。qRT-PCR检测20μg/ml柚皮苷能够抑制:Fas、FasL、Caspase-8mRNA表达(P<0.05)。E1isa结果显示20μg/ml柚皮苷可以明显上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax、Caspase-3蛋白表达(P<0.05)。结论柚皮苷可能通过调控Fas/Fasl死亡受体凋亡通路和线粒体凋亡通路抑制人退变椎间盘髓核细5胞凋亡。更多还原