补肾益气方通过诱导滋养细胞IDO的表达调节母胎界面耐受状态

【作者】 杨少良； 牛甜甜； 李明清； 王海燕；

【机构】 复旦大学附属妇产科医院；

【摘要】 背景:复发性不明原因流产是常见的妊娠并发症,在育龄妇女中发病率约为1%~2%。中医药在治疗复发性不明原因流产中起到了重要的作用,但其作用机制仍有待进一步研究。吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)对调节性T细胞的分化及母胎免疫状态的维持已有研究,但IDO对NK的调节作用尚不清楚。本文旨在对补肾益气方在母胎界面的调节作用机制进行探讨。目的:研究补肾益气方在调节母胎界面耐受状态的机制及吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)对蜕膜NK细胞杀伤功能的影响。方法:用免疫组织化学法测定正常绒毛组织和流产绒毛组织内IDO的表达。体外培养原代滋养细胞及滋养细胞细胞系HTR-8/SVneo,加入不同浓度的含药大鼠血清和对照大鼠血清,采用流式细胞术检测滋养细胞IDO的表达情况。IDO特异性抑制剂1-甲基-色氨酸(1-MT)阻断HTR-8/SVneo内IDO 48h后与外周血NK细胞(pNK)及蜕膜NK(dNK)共培养,流式细胞术检测NK的杀伤性分子的差异。对照大鼠血清及含药大鼠血清分别处理HTR-8/SVneo 48小时后与dNK、pNK共培养,测量对NK细胞的调节作用。结果:免疫组化的结果显示正常绒毛中IDO的表达明显较流产绒毛高。而IDO对NK细胞的杀伤功能具有调节作用,1-MT阻断HTR-8/SVneo中的IDO 48h后与pNK共培养24h,1-MT处理组与对照组相比,NK细胞表达的CD16、NKP30、NKP46、Perforin较高,差异具有统计学意义,表明IDO可能可以抑制NK细胞的杀伤功能。2.5%及5%的含药血清培养HTR-8/SVneo后,HTR-8/SVneo表达的IDO较对照组高,含药血清处理的HTR-8/SVneo IDO的阳性率、平均荧光密度均上升。用含药血清培养过后的HTR-8/SVneo与pNK共培养,NK.的杀伤性分子表达下降,杀伤功能降低。结论:补肾益气方可以通过上调滋养细胞中IDO的表达,抑制NK细胞的杀伤功能,维持母胎界面的耐受状态,对不明原因流产患者起到一定的保护作用。更多还原