利用tasiRNA对大豆抗病基因GmNH23的功能研究

【作者】 于若男； 哈达；

【机构】 内蒙古大学生命科学学院/内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室；

【摘要】 大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是一种对大豆质量和产量造成严重破坏的植物病毒。之前,我们已经发现并成功克隆了对SMV具有抗性的一条基因GmNH23,这条基因为一个编码NBS-LRR蛋白的抗病毒基因。但对于大豆GmNH23基因对抗SMV的机理尚不明确。因此,需要对此基因的功能和作用机理进一步研究。在真核生物已发现了大量的非编码小RNA分子,如microRNA、siRNA和piRNA。siRNA是一类约20-30nt的互补双链RNA,siRNA能通过RNAi作用引发RNA沉默,参与植物对外源病原体的防御作用,而在染色体上发现的内源性siRNA则是细胞主动利用RNAi机制,其中就包括反式作用干扰小RNA(transacting siRNAtasiRNA)。单个miRNA靶标足以产生tasiRNA,其靶向序列可被结合到载体中以诱导产生siRNAs,并最终导致基因沉默。通过在转基因毛状根和转基因植株中沉默转基因RFP基因,对miRNA靶标进行了实验验证。然后利用miRNA沉默大豆中GmNH23内源性基因,再对转基因大豆对抗SMV表型变化及分子检测来验证GmNH23基因的功能。更多还原