液-质联用中不同酶对蚕丝丝素蛋白组的影响研究

【作者】 陈茹茹； 胡勤莉； 朱诚； 胡智文； 王秉；

【机构】 浙江理工大学材料科学与工程专业先进纺织材料与制备技术教育部重点实验室；

【摘要】 蚕丝是中国古代的文明产物之一,主要由丝素和丝胶组成[1,2]。丝胶是亲水性球状蛋白,在外界环境的作用下易于降解,而丝素作为一种纤维状蛋白质,具有大量分子内和分子间氢键,能形成高度有序的结晶结构,历经千年仍能被检测出来,从而成为鉴定丝织品文物的关键[3,4,5]。为减少对丝素蛋白序列结构的破坏,本实验探究了液-质联用中不同酶切处理对丝素蛋白组的影响。使用碱法对桑蚕丝进行脱胶,将得到的丝素纤维在50%CaCl2溶液中加热溶解,可得到丝素蛋白溶液,经透析、冷冻干燥后制得丝素蛋白粉末。采用红外光谱(FTIR)对丝素粉末的二级结构进行表征;在质谱测试中,选择弹性蛋白酶和胰蛋白酶分别对丝素进行酶切,通过对得到的多肽段序列进行分析比较可以确定(如表1),弹性蛋白酶对丝素多肽序列的破坏小,多肽序列匹配的覆盖率高。该研究可以完善对古代丝织品残留物的鉴定分析体系,减少对文物样结构的破坏,最大程度保证鉴定结果的准确性。更多还原