基于UPLC-MS/MS对黑顺片中二萜类生物碱吸收转运的研究

【作者】 刘媛媛； 丁茹； 韦梦莹； 岳可心； 汪戎锦； 刘忠英；

【机构】 吉林大学药学院； 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室；

【摘要】 黑顺片是附子的炮制品,主要活性成分是生物碱。为了阐明黑顺片在小肠中的主要吸收方式,本研究采用液质联用技术,首先将所得黑顺片生物碱提取液样品进行分离,然后应用三重四级杆的多离子反应检测方式(MRM),来对黑顺片中5种主要的生物碱进行定量分析,最后利用Caco-2细胞模型研究了黑顺片中这5种二萜类生物碱的吸收转运情况。根据黑顺片提取液中各种生物碱质谱碎裂规律[1],确定出黑顺片中主要的五种二萜类生物碱化学成分:苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰中乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、次乌头原碱和中乌头原碱。并用UPLC-MS/MS对其进行分离和定量(如图1和表1)。建立Caco-2单层细胞模型[2],通过对0.4、0.6、0.8和1.0mg/mL这四组不同浓度黑顺片生物碱提取液在Caco-2单层细胞模型中的转运研究,发现0.4～1.0mg/mL浓度下黑顺片中5种生物碱的表观渗透系数均大于1×10-6cm/s,说明黑顺片中生物碱在小肠中吸收良好。5种二萜类生物碱表观渗透系数在实验浓度范围内并未发生明显变化,且外排转运率值在0.8～1.5之间,故推断黑顺片中二萜类生物碱以被动转运为主。为黑顺片中生物碱吸收转运机制的深入研究奠定了基础。更多还原