具备轴向分辨的多角度表面等离子体耦合发射荧光显微成像技术

【作者】 陈敏； 刘倩； 曹烁晖； 霍斯欣； 潘晓会； 翟艳云； 李耀群；

【机构】 厦门大学化学化工学院谱学分析与仪器教育部重点实验室；

【摘要】 荧光显微技术因高灵敏度、高选择性等特点,被广泛应用于生物样品的检测,但由于衍射极限的限制,其轴向分辨率较低1。表面等离子体耦合发射荧光显微镜(Surface Plasmon Coupled Emission Microscope,SPCEM)是一种基于近场激发态荧光团与表面等离子体相互作用而建立的新型荧光显微技术,可提高近场空间分辨率2-4。本文基于荧光团-界面距离与激发光入射角度的关系,进一步发展了具备轴向分辨能力的多角度SPCEM,并应用于细胞的分区成像检测。由于荧光分子的位置差异,细胞膜标记细胞与细胞核标记细胞出现不同的角度分布(Fig.1a)。同时,随着激发角度的增大,荧光成像深度逐渐变浅,θC处成像深度深入细胞核,而θSPCE处成像深度限定在近细胞膜区(Fig. 1b)。SPCEM通过改变激发角度调控成像区域,可提高轴向分辨率和信噪比,有望应用于细胞内吞作用等生命活动过程的分区灵敏检测。更多还原