ZEB-1通过调控mTOR表达影响乳腺癌细胞药物敏感性的分子机制

【作者】 陈秋晨； 胡晓云； 王艺霖； 赵鹏飞； 张晶； 吴慧哲； 姚维范； 赵海山； 魏敏杰；

【机构】 中国医科大学药学院；

【摘要】 目的:ZEB-1是锌指蛋白类转录因子,与细胞的侵袭转移等生物学行为密切相关,并参与肿瘤的发生发展。mTOR通路在肿瘤发生发展及多药耐药过程中亦扮演重要角色。本实验研究细胞因子ZEB-1对mTOR表达的影响,并研究ZEB-1影响乳腺癌细胞对紫杉醇药物敏感性的分子机制。方法:共转染转录因子ZEB-1过表达质粒和pGL3-mTOR-pro萤火虫荧光素酶质粒至293T工具细胞及MCF-7乳腺癌细胞,双荧光素酶法检测转录因子ZEB-1对mTOR启动子区转录活性的影响。CHIP法确证ZEB-1与mTOR启动子区的结合区域。转染pcDNA3.1-mTOR-pro质粒至MCF-7乳腺癌细胞,同时转染pcDNA3.1-ZEB-1,检测转录因子ZEB-1对MCF-7乳腺癌细胞侵袭、转移和增殖的影响,并检测转染质粒前后,MCF-7乳腺癌细胞紫杉醇IC50的变化。结果:与阴性对照组相比,转染ZEB-1过表达质粒组的荧光素酶强度明显升高,CHIP实验进一步证实,ZEB-1与mTOR基因启动子区存在结合位点。ZEB-1可使MCF-7乳腺癌细胞的侵袭、转移和增殖作用增强,转染ZEB-1过表达质粒前后紫杉醇对MCF-7乳腺癌细胞的IC50值分别为5.23±0.37μM和16.33±1.36μM。结论:ZEB-1可通过调控mTOR启动子活性增加mTOR表达,进一步影响乳腺癌细胞的生物学行为和紫杉醇的药物敏感性。更多还原