活性氧在氨基酮戊酸光动力疗法抑制HaCaT细胞过度角化KGFR信号通路中的作用

【作者】 易飞； Maya Valeska Gozali； 刘娟； 张家安； 吴红巾； 骆丹； 周炳荣；

【机构】 南京医科大学第一附属医院皮肤性病科；

【摘要】 目的:观察活性氧(ROS)在氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)抑制角质形成细胞过度角化中的作用及其机制。方法:先将人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞分为5组:空白对照组、还原性谷胱甘肽(GSH)组、成纤维生长因子-10(FGF-10)组、FGF-10+ALA-PDT组、FGF-10+ALA-PDT+GSH组。用CCK-8法检测细胞增殖活性,Western印迹法检测角质形成细胞过度角化及增殖相关蛋白K1、K6、K16及角质细胞生长因子受体(KGFR)的含量,ELISA法检测各组细胞上清液中IL-1α蛋白表达,免疫荧光检测各组KGFR和K6蛋白表达水平,流式细胞仪检测ROS含量。统计分析采用单因素方差分析。结果:流式细胞术检测示,ALA-PDT可增加ROS的表达(P<0.05),而GSH抑制ROS的表达(P<0.05)。FGF-10还可促进K1、K6、K16蛋白和KGFR的表达(均P<0.05),FGF-10+ALA-PDT组细胞角蛋白K1、K6、K16和KGFR的相对表达量分别与FGF-10组比较均显著降低,差异有统计学意义(均P<0.05),而GSH可抑制这些蛋白的表达(均P<0.05)。ELISA法显示,FGF-10+ALA-PDT组细胞IL-1α蛋白分泌分别与FGF-10组比较均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),而GSH可抑制IL-1α蛋白分泌(P<0.05)。结论:ALA-PDT能通过诱导产生ROS破坏HaCaT细胞中的KGFR信号通路,而抑制角质形成细胞中的过度角化及增殖。更多还原