蛋白酶体活性抑制剂对人内脏脂肪细胞成脂分化的影响

【作者】 周亚慧； 尤梁惠； 张凡； 王兴； 李沄； 文娟； 季晨博； 顾筱琪； 崔县伟； 郭锡熔；

【机构】 南京医科大学附属南京妇幼保健院儿童保健科南京市妇幼保健院医学研究中心；

【摘要】 目的:比较肥胖及正常人群来源的大网膜白色脂肪组织中蛋白酶体的含量和活性;探究蛋白酶体活性抑制剂对人内脏脂肪细胞增殖、凋亡、细胞周期以及成脂分化影响。方法:qPCR及Western Blot检测肥胖人群及正常人群网膜脂肪组织、脂肪细胞分化过程及胰岛素抵抗细胞模型中蛋白酶体活性的变化;予以蛋白酶体抑制剂MG132干预,流式细胞仪检测术、CCK8试剂盒、油红O染色等方法分别检测蛋白酶体活性变化对脂肪细胞增殖、凋亡、细胞周期、成脂分化的作用。结果:肥胖组WAT中蛋白酶体三个亚基基因表达,蛋白含量及活性均明显高于正常组;蛋白酶体的含量和活性在脂肪分化成熟过程中呈逐渐升高;葡萄糖和棕榈酸干预后,蛋白酶体的基因表达及活性呈逐渐增加;随蛋白酶体活性抑制剂干预浓度的增加,脂肪细胞脂滴减少,甘油三酯的含量降低,成脂分化相关基因(PPAR-γ,C/EBPα,C/EBPβ)及PPAR-γ蛋白的表达量逐渐降低。结论:肥胖人群中蛋白酶体基因表达及活性明显高于正常人群,提示了蛋白酶体的活性在肥胖人群及成熟脂肪细胞中呈现活跃状态。在脂肪分化成熟过程中蛋白酶体的表达及活性亦呈逐渐上升趋势,高糖高脂刺激可以增加蛋白酶体蛋白酶体的基因表达及亚基的活性,提示抑制泛素-蛋白酶体途径可能通过增加前体蛋白或多肽的含量进而抑制人内脏脂肪细胞成脂分化。我们的研究为肥胖的预防和治疗提供了新的靶标和思路。更多还原