体外模拟生理条件下木聚糖酶的稳定性研究

【作者】 胡凯飞； 王金荣； 李晓洁； 苏兰利； 赵银丽； 李溪； 杨强；

【机构】 河南工业大学生物工程学院； AB Vista Asia Pte Ltd；

【摘要】 本实验在体外模拟动物胃肠道生理条件下,对木聚糖酶的稳定性进行研究,进而评价木聚糖酶在动物体内的耐受能力。采集市售5种不同厂家的木聚糖酶制剂,酶活分别为9 824、10 837、5 312、8 336和26 561BX U/g,经胃蛋白酶和胰蛋白酶反应后,测定木聚糖酶的留存率。胃蛋白酶反应:分别称取5种木聚糖酶制剂1 g,加入20 mL胃蛋白酶溶液(20 U/mL,pH=2.5),在40℃条件下保持30 min,立即冰水浴终止反应,调整pH至5.3,定容至50 mL,测定木聚糖酶存留率(%)。胰蛋白酶反应:移取胃蛋白酶反应后溶液10 mL,调节pH至7.0,加入30 mL胰蛋白酶溶液(30 U/mL,pH=7.0),用Tris-Hcl溶液(0.05 mol/L,pH=7.0),定容至50 mL,在40℃条件下保持30 min,立即冰水浴终止反应,调整pH至5.3,定容至100 mL,测定木聚糖酶存留率(%)。结果表明:5种木聚糖酶制剂经胃蛋白酶降解后其酶活存留率分别为84.25%、97.57%、40.20%、34.77%和98.81%,再经胰蛋白酶降解后木聚糖酶的存留率分别为81.82%、85.34%、29.94%、21.22%和82.26%,不同酶制剂经胃蛋白酶降解后的和胰蛋白酶降解后木聚糖酶的存留率均差异极显著(P<0.05)。由此可见,本实验条件下,一定质量的木聚糖酶制剂对体外模拟的动物生理条件下,不同产品的存留率不同,并呈显著性差异。该结果也进一步说明不同酶制剂产品对体外模拟动物生理环境的耐受性存在显著性差异,留存率高的木聚糖酶产品降解率低,耐受性好,有利于酶制剂在体内对饲料及食糜中的木聚糖进一步降解。更多还原