【作者】 刘远征； 漆艳香； 曾凡云； 丁兆建； 彭军； 谢艺贤； 张欣；

【机构】 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所；

【摘要】 香蕉枯萎病(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)是破坏香蕉维管束导致植株死亡的毁灭性土传病害,其病菌腐生能力很强,在土壤中可长期存活。唑类药剂是目前用于防治该病害的主要杀菌剂之一,其靶标为细胞色素P450甾醇14α脱甲基酶(CYP51),是甾醇生物合成中的关键酶。在镰刀菌属真菌中含有3个GYP51基因,根据基因进化聚类分析分为3类,分别为CYP51A,CYP51B和CYP51C。为明确3个CYP51基因与唑类杀菌剂敏感性的关系,以及与香蕉枯萎病菌致病力之间是否存在相关性,本实验以香蕉枯萎病菌基因组DNA为模板,分别克隆出3个基因,分析其序列特征、推测蛋白的保守结构域,并构建了pSilent-1沉默载体,利用RNA干扰技术探讨香蕉枯萎病菌3个CYP51基因的功能。结果表明:CYP51A基因DNA和cDNA全长序列分别为1 574bp、1 521bp,编码506个氨基酸;CYP51B基因DNA和cDNA全长序列分别为1 761bp、1 584bp,编码527个氨基酸;CYP51C基因DNA和cDNA全长序列分别为1 659bp、1 512bp,编码503个氨基酸。3个CYP51基因在蛋白质水平存在59.60%的同源性,具有典型的p450保守结构域。该沉默载体已构建完成,为下一步获得沉默突变体以及分析其基因功能奠定良好基础。更多还原