几种黏菌显型原质团神经肽Y的定位与分布研究

【作者】 李艳双； 张波； 戴丹； 任琪圆； 李玉； 王晓丽；

【机构】 吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心； 吉林农业大学农学院；

【摘要】 黏菌个体通常十分微小,是兼具有真菌和原生动物特征的一类真核生物,具有简单的生活史循环,即以原质团为表现形式的营养阶段和以一定形态子实体为表现形式的繁殖阶段。本试验通过孢子萌发、野外采集原质团、基物湿室培养获得稳定继代培养的显型原质团:针箍菌(Physarella oblonga),煤绒菌(Fuligo septica),黄头绒泡菌(Physarum flavicomum),多头绒泡菌(Physarum polycephalum)。取各个种长势粗壮的原质团制作冰冻切片和石蜡切片,进行HE染色、Hoechst细胞核染色,确定黏菌原质团细胞结构,各细胞器存在状态和结构。镜下可以观察到有规律排列的大小不等的空泡,因为是横切,分析为原生质流动的腔;染色较深的细胞核及核糖体,细胞核密集分布;其他细胞器分布在核周围。选择兔抗NPY多克隆抗体为一抗,羊抗兔Ig G为二抗,通过SABC-FITC荧光免疫组化方法对几种原质团进行NPY抗原检测,PBS替代一抗和二抗为空白对照,小鼠大脑为阳性对照,在荧光显微镜下进行观察。结果表明黏菌显型原质团和阳性对照冰冻切片均有黄绿色荧光颗粒分布,且原质团膜部位荧光反应强烈。说明原质团中存在NPY类物质,且在原质团的膜部位含量较高。分析原因为黏菌原质团没有专门的摄取食物的部位,取食一般发生在扇面结构的前端,而NPY是与生物进食特性最相关的物质,因此其发生主要集中在原质团扇面结构的边缘。更多还原