果胶裂解酶基因pelC和木聚糖酶基因xyn2双价酵母表达载体的构建

【作者】 徐林； 黄静； 孔华； 郭安平；

【机构】 中国热带农业科学院热带生物技术研究所；

【摘要】 【研究目的】菠萝叶纤维作为新型纺织材料备受关注,但菠萝叶纤维需要脱胶才能纺纱。胶质的主要成分是果胶和半纤维素,所以果胶裂解酶和木聚糖酶在生物脱胶过程中起到了关键作用。构建果胶裂解酶和木聚糖酶双价酵母表达载体将为双基因共表达提供基础。【方法】采用双基因同向连接的策略构建双价表达载体。设计引物分别从p Pic9K-pel C与p Pic9K-xyn2单价载体中扩增连接片段,再将分别双酶切p Pic9K、pel C、xyn2片段通过粘性末端连接构建双价载体。通过PCR、酶切和测序等方法进行验证。【结果】通过引物及酶切位点设计和酶切连接,成功构建了大小为12916bp的p Pic9K-pel C-xyn2双价酵母表达载体,其中外源基因都单独含有AOX强启动子和终止子。【结论】成功构建了果胶裂解酶基因pel C和木聚糖酶基因xyn2双价酵母表达载体,为菠萝叶纤维脱胶双价工程菌应用研究提供了基础。更多还原