青春期前锰暴露对下丘脑内GABAARα1调控GnRH释放的影响

【作者】 杨欣欣； 宋奇繁； 刘巍； 徐斌； 徐兆发； 邓宇；

【机构】 中国医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室；

【摘要】 目的:探讨青春期前雌性大鼠锰暴露对下丘脑内GABAARα1调控GnRH神经元释放的影响,为阐明锰致雌性大鼠性早熟的机制及预防提供理论依据。方法:健康PND21天SD大鼠40只,按体重随机均分成4组。通过灌胃分别给与4组大鼠:等剂量生理盐水、2.5、5、10 mg/kg MnCl2。每天染毒1次,持续12天。观察大鼠阴道开口情况,并于阴道开口后进行阴道涂片监测动情周期。大鼠进入首个动情间期当日处死大鼠。每组有4只大鼠用腹腔注射麻醉后进行多聚甲醛灌流,取脑组织剥离下丘脑后进行石蜡包埋用于HE染色和免疫荧光测量GABAARα1的表达。剩余大鼠腹腔麻醉后,腹主动脉采血用ELISA法检测血清中GnRH、LH、FSH、E2激素浓度,取脑组织分离下丘脑并提取总蛋白用于western blotting检测GABAARα1的表达。结果 ;随着染锰剂量的增加大鼠血清GnRH、FSH、LH和E2激素水平逐渐增加,并呈剂量-依赖性关系,与对照组大鼠血清的GnRH(6.26±0.57mIU/ml)、FSH(1.09±0.04IU/L)、LH(5.22±0.46mIU/m1)和E2(6.05±0.80pmol/L)的水平相比,在10 mg/kg MnCl2组以上各激素水平增加最为明显,分别是对照组的1.30,1.22,1.14,1.52倍。通过western blotting检测结果显示,随着染锰剂量的增加,大鼠下丘脑内GABAARα1蛋白水平呈现逐步下降趋势,其中10 mg/kg MnCl2组GABAARα1蛋白水平较对照组下降10.22%。应用免疫荧光检测发现,与对照比较,随染锰浓度的增加GABAARα1红色荧光强度逐渐下降,2.5、5、10mg/kg MnCl2组分别比对照组下降15.58%、33.55%、63.58%。结论:青春期前暴露高浓度锰可通过降低下丘脑内GABAR表达水平进而促进GnRH释放,影响下丘脑-垂体-性腺轴相关激素释放,促进性早熟。更多还原