华支睾吸虫检测方法的建立及其应用研究

【作者】 黄达娜； 张仁利； 阳帆； 吴春利； 李玥； 唐屹君；

【机构】 深圳市疾病预防控制中心微生物检验科；

【摘要】 目的建立和比较华支睾吸虫的免疫胶体金(ICT)和实时荧光定量PCR检测体系,并评价检测华支睾吸虫的效果。方法以华支睾吸虫成虫抗原包被胶体金,检测血液样本中的相应抗体,建立华支睾吸虫ICT检测方法;以华支睾吸虫18S rRNA基因作为靶基因,设计RT-PCR的特异性引物和探针,检测粪便样本中的核酸,建立实时荧光定量PCR方法;以两种检测体系与商品化的酶联免疫(ELISA)检测试剂盒平行测定比较,考核检测体系的应用价值。结果对200份华支睾吸虫重点人群样本进行检测,ELISA法检出的华支睾吸虫IgG抗体阳性例数为20例,阳性率为10%;ICT法检出的华支睾吸虫IgG抗体阳性例数为16例,阳性率为8%,灵敏度为80%,特异性为100%,符合率为98%,ICT和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ~2=2.25,P>0.05);RT-PCR法检出的粪便样本中华支睾吸虫核酸阳性例数为18例,阳性率为9%,灵敏度为90%,特异性为100%,符合率为99%,RT-PCR和ELISA两种检测方法差异无统计学意义(χ~2=0.05,P>0.05)。结论建立的ICT及RT-PCR两种检测方法特异性好、灵敏度高;分别适用于华支睾吸虫现场的快速检测及定量分析。三种检测方法的联合应用将为华支睾吸虫的感染与诊断提供有效的技术手段。更多还原