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硬皮病患者诱导性多能干细胞系(iPS)的建立
【作者】 李健； 袁美芬； 郭雪妹； 高正凤； 朱芬华； 徐锦；
【机构】 复旦大学附属儿科医院临床检验中心；
【摘要】 目的利用硬皮病患者尿液细胞构建诱导性多能干细胞(induced pluriPotent stem cells,iPSCs)系并对其全能性进行鉴定。方法采用慢病毒介导逆转录的方法,将含有Sox2、Klf4、Oct4和Nanog四个混合因子的慢病毒转染人尿液细胞,诱导出干细胞样克隆。根据人胚胎干细胞的特性,利用AP染色、实时荧光定量PCR(real-time PCR)、免疫荧光技术对获得的iPS细胞进行鉴定。结果获得的iPS细胞镜下观察呈典型的克隆状生长,圆形或椭圆形,与饲养层细胞分界清楚;AP染色阳性,real-time PCR及免疫荧光检测iPS细胞高表达人胚胎干细胞相关基因及蛋白。结论我们的研究结果提示:硬皮病患者尿液细胞可重编程为iPS细胞,为硬皮病的发病机制研究和细胞移植治疗提供更好的细胞模犁。
- 【会议录名称】 纪念中国微生物学会临床微生物学专业委员会成立五周年-第五届中国临床微生物学大会暨台湾海峡两岸微生物学与免疫学论坛论文汇编
- 【会议名称】纪念中国微生物学会临床微生物学专业委员会成立五周年-第五届中国临床微生物学大会暨台湾海峡两岸微生物学与免疫学论坛
- 【会议时间】2014-09-13
- 【会议地点】中国浙江宁波
- 【分类号】R593.25;R440
- 【主办单位】中国微生物学会临床微生物学专业委员会、医学参考报社、宁波大学医学院附属医院