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宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中作用的初步研究
【作者】 董阳超； 雷迎峰； 潘鹭翔； 时莹； 丁天兵； 徐志凯；
【机构】 第四军医大学微生物学教研室；
【摘要】 目的:探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV)RNA复制中的作用。【方法】DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2hr、24hr、36hr、48hr)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR(RT-qPCR)分析lsm-1表达水平;将lsm-1的siRNA和非特异对照siRNA两次转染HepG2细胞后感染DENV-2,24hr后收集细胞,提取总mRNA,RT-qPCR分析lsm-1表达水平与病毒RNA表达水平;利用LSm-1抗体与dsRNA抗体对DENV感染细胞进行免疫荧光染色,激光共聚焦分析LSm-1与dsRNA共定位情况。【结果】与2hr时相比,随着时间的推移,DENV-2 RNA和LSm1 RNA水平逐渐升高;与对照组siNC相比,siLSm1组LSm1 RNA水平明显降低,沉默效率达78.2%;与对照组siNC相比,siLSm1组DENV RNA含量降低35.6%;LSm1-7复合体在DENV感染HepG2细胞后募集到核周围,与DENV dsRNA共定位。【结论】LSm1-7复合体可能作为DENV复制复合物的组成部分,正调控DENVRNA的复制。
- 【会议录名称】 第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛论文汇编
- 【会议名称】第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛
- 【会议时间】2012-10-12
- 【会议地点】中国浙江杭州
- 【分类号】R440
- 【主办单位】中国微生物学会临床微生物学专业委员会、《医学参考报》微生物学与免疫学频道编委会、宁波大学医学院附属医院