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原生质体ARTP诱变筛选高产L-谷氨酸菌株
【作者】 梁玲； 黄勤勤； 王慧梅； 翁雪清； 黄建忠； 吴松刚；
【机构】 工业微生物发酵技术国家工程研究中心(福建师范大学)；
【摘要】 L-谷氨酸是目前世界上产量最大的氨基酸,全球谷氨酸的需求超过300万吨,大约占世界氨基酸产量的一半,在食品、医药、人造制革、化妆品工业及农业上具有广泛的用途。L-谷氨酸的生产方式基本为发酵法,当前在谷氨酸的用途不断发展的今天,如何更有效地降低成本,提高发酵水平成为能够在行业当中立于不败之地的关键。常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变系统能够在常压下产生25-40℃的具有高活性粒子浓度的等离子体射流,通过作用于微生物细胞造成有效的DNA多样性损伤,是新近发展起来的非常安全高效的诱变系统。本研究以高产L-谷氨酸的谷氨酸棒杆菌工程菌为出发菌株,研究了其原生质体形成和再生的最佳条件:斜面培养12h后,制备菌悬液,按2%的接种量转入含5%甘氨酸的液体培养基中继续培养12h,收集细胞,以SMM溶液作为渗透压稳定剂,采用1.0%的溶菌酶,30℃C条件下酶解1.5h,ARTP诱变系统最佳处理时间为60S。获得的诱变株经96孔板初筛及摇瓶复筛,获得一株L-谷氨酸含量显著提高的变株YAG117,其摇瓶发酵L-谷氨酸含量达16.3g L-1,较出发菌株提高13.9%,且连续传代十代表现稳定,展现了良好的潜在生产应用价值。
- 【会议录名称】 华东地区生物化学与分子生物学学会联合会2017年学术交流会暨安徽省生物化学与分子生物学学会理事会议论文集
- 【会议名称】华东地区生物化学与分子生物学学会联合会2017年学术交流会暨安徽省生物化学与分子生物学学会理事会议
- 【会议时间】2017-10-27
- 【会议地点】中国安徽合肥
- 【分类号】Q93
- 【主办单位】上海市生物化学与分子生物学学会、江苏省生物化学与分子生物学学会、浙江省生物化学与分子生物学学会、安徽省生物化学与分子生物学学会、福建省生物化学与分子生物学学会、江西省生物化学与分子生物学学会、山东省生物化学与分子生物学学会