Cav-1^-/-小鼠肝癌模型的建立及血清核心岩藻糖基化水平的变化

【作者】 张宏硕； 董伟杰； 陈茜茜； 张嘉宁；

【机构】 大连医科大学生物化学与分子生物学教研室糖生物学研究所； 大连理工大学生命与医药学院；

【摘要】 窖蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)是胞膜窖的主要结构和功能成分,参与调控胆固醇转运、细胞内吞、信号转导以及肿瘤的恶性行为。经典Wnt信号通路在细胞的分化、增值、凋亡等生理过程中,以及细胞的癌变肿瘤侵袭等病理过程中起了重要的调控作用,其核心因子β-catenin与TCF/LEF结合促进下游靶基因转录。而机体内异常的糖基化与疾病的发生密切相关,核心岩藻糖基化是肿瘤中异常的糖基化之一,其主要由核心岩藻糖基转移酶8(α1,6-fucosyltransferase,FUT8/Fut8)催化完成,即N-聚糖核心的N-乙酰葡糖胺(Glc NAc)通过α1-6糖苷键与岩藻糖相连。本实验室前期结果表明Wnt经典通路可以上调人肝癌细胞7721中FUT8和小鼠肝癌细胞Hepa1-6中Fut8的转录活性,提示:Cav-1可能通过经典Wnt/β-catenin信号通路对小鼠肝癌细胞的核心岩藻糖基转移酶的表达具有调控作用。本研究以Cav-1基因敲除小鼠为研究对象,通过小鼠肝癌模型的建立,研究在体内Cav-1是否通过Wnt/β-catenin调控Fut8基因的表达和α1-6岩藻糖基化水平,从而影响肝癌的恶性行为。q PCR、免疫印迹分析、凝集素印迹及生物质谱分析结果显示:与野生型小鼠相比,Cav-1-/-肝癌小鼠肝脏组织及血清中核心岩藻糖基化水平显著升高,β-catenin表达上升;结果进一步证明Cav-1敲除鼠较野生型小鼠成癌前后血清核心岩藻糖基化水平降低。这提示Cav-1表达与否进一步激活了Wnt/β-catenin通路,影响了小鼠肝癌血清中核心岩藻糖基化水平。更多还原