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沉默Survivin基因抑制SW480细胞的增殖及下调hTERT基因表达
【作者】 王平； 肖琳； 董俊红； 李桂枝； 赵春玲； 王守训；
【机构】 潍坊医学院生化教研室；
【摘要】 目的观察生存素(SURVIVIN)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制。方法构建携带Survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-Survivin,转染结肠癌SW480细胞,MTT检测细胞增殖改变,流式细胞仪检测细胞增殖周期的改变;荧光定量PCR和Western-blot检测Survivin、hTERT和Sp1的mRNA和蛋白表达水平,TRAP-ELISE法检测端粒酶活性。构建靶向Sp1基因的RNA干扰载体,转染SW480细胞,荧光定量PCR和Western-blot检测hTERT基因mRNA和蛋白表达水平,PCR-ELISE法检测端粒酶活性。结果 Survivin基因干扰后,SW480细胞增殖受到明显抑制,增殖抑制率为34.44%,G0/G1期细胞增加,S期和G2/M期细胞减少。hTERT和Sp1基因的mRNA和蛋白表达水平显著降低,端粒酶活性降低。Sp1基因干扰后,hTERT基因的mRNA和蛋白表达水平及端粒酶活性下降。结论靶向沉默Survivin基因对SW480细胞增殖有明显的抑制作用;同时下调hTERT基因表达,其机制可能与Sp1基因表达下调有关。
【基金】 山东省自然基金资助项目,No.ZR2010HM06;国家自然基金资助项目,No.30901779
- 【会议录名称】 第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会论文汇编
- 【会议名称】第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会
- 【会议时间】2013-08-19
- 【会议地点】中国山东青岛
- 【分类号】R346
- 【主办单位】中国生物化学与分子生物学会医学生物化学与分子生物学分会、中国生物化学与分子生物学会临床应用生物化学与分子生物学分会、华东六省一市生物化学与分子生物学学会、江苏省生物化学与分子生物学学会、上海市生物化学与分子生物学学会、浙江省生物化学与分子生物学学会、安徽省生物化学与分子生物学学会、福建省生物化学与分子生物学学会、江西省生物化学与分子生物学学会、山东省生物化学与分子生物学学会