EgM家族重组蛋白(EgM9、EgM123)免疫犬引起的免疫应答研究

【作者】 王俊伟； 赵莉； 石保新； 阿帕克孜·麦麦提； 张壮志；

【机构】 新疆畜牧科学院兽医研究所；

【摘要】 目的本研究通过抗体检测和免疫组织化学方法,探索Eg M家族重组蛋白(Eg M9、Eg M123)免疫犬,引起的抗体变化和肠道粘膜产生的免疫应答状况,以期为临床研制相关检测试剂盒及疫苗提供实验依据。方法用符合免疫抗原要求的Eg M9、Eg M123重组蛋白分别免疫犬,设为两个免疫组,直接感染原头蚴为感染组,PBS为对照组,定期采血并分离血清。结果与结论 ELISA结果显示,重组蛋白与血清发生特异性抗体反应,三免后一周抗体水平达到最高。淋巴细胞因子IFN-γ,0 wks、5 wks与27wks差异显著(P<0.05),且PBS与免疫组、感染组差异显著(P<0.05),但免疫组间差异不显著(P>0.05);而血清中淋巴细胞因子IL10和血浆中淋巴细胞因子IL4,免疫组与感染组差异不显著(P>0.05),但都比PBS组有近几十倍的增加。依据免疫组织化学原理,运用直接法和抗原~抗体~抗体标记物法(三步法)对实验犬的小肠组织进行检测。直接法结果显示,免疫组和感染组都存在Ig G抗体靶位点,反应均呈阳性;三步法结果表明,免疫组为阳性反应,感染组和PBS组呈阴性,表明该法可定位检测免疫犬小肠上的Ig G靶位点。结果也显示,不论是Eg M重组蛋白免疫犬还是细粒棘球绦虫(原头蚴)感染犬,都能引起宿主机体的Th1型和Th2型反应明显上升,激起机体很强的体液免疫和细胞免疫。更多还原