FGF21对脂肪间充质干细胞增殖及成脂分化能力的影响研究

【作者】 潘真真； 赵汇； 白杨； 张慧颖； 张利宁； 王群；

【机构】 山东大学；

【摘要】 目的:FGF21属于FGF家族成员之一,主要由肝脏和脂肪组织产生,分别由PPARα和PPARγ调控表达。FGF21通过与细胞表面的β-Klotho-FGFR结合发挥作用。跨膜蛋白β-Klotho是FGF21的辅助受体,FGF21通过β-Klotho与FGF受体结合,使受体发生二聚化、自身磷酸化,进而激活下游信号传导蛋白和转录激活物等。FGF21可抑制与脂肪酸和甘油三酯合成有关基因的表达,促进脂肪燃烧供能,调节血浆与肝脏的脂质代谢。脂肪间充质干细胞是脂肪组织,基质血管成分中具有多向分化潜能的组织干细胞,在体外可被诱导分化为脂肪细胞。本研究拟探究FGF21对脂肪间充质干细胞的特性及功能的影响。方法:分离C57BL/6小鼠下肢皮下脂肪组织中的间充质干细胞,实验组给予FGF21刺激,对照组给予等量PBS,通过EdU、CCK8的方法来检测FGF21对脂肪间充质干细胞增殖能力的影响。用成脂诱导剂对脂肪间充质干细胞进行成脂诱导,实验组给予FGF21刺激,对照组给予等量PBS。分别在脂诱导0天、4天、8天、12天时收取诱导细胞RNA,并采用RT-PCR的方法来检测脂肪细胞相关标志基因的表达变化,诱导16天后进行油红O染色观察脂肪细胞形成情况;同时收取蛋白,通过western-blot方法对PPAR-γ进行检测。结果:增殖实验中,实验组给予FGF21刺激,对照组给予PBS,刺激24小时之后进行EdU染色,染色实验结果显示FGF21对脂肪间充质干细胞的增殖无明显影响。另外,在0h、12h、24h、36h通过CCK8的方法同样证实两组增殖能力无统计学差异。将实验组和对照组同时进行成脂诱导,其中实验组给予FGF21刺激,对照组给予等量PBS。油红O染色结果显示实验组的脂滴含量明显低于对照组。RT-PCR结果发现脂肪细胞标志基因CEBP/α、αP-2、PPAR-γ、Adiponectin的表达较对照组显著下降,western-blot结果显示实验组PPAR-γ的表达量显著下降。结论:FGF21可明显抑制皮下脂肪间充质干细胞的成脂分化,但对其增殖能力无显著影响。更多还原