MS417抑制树突状细胞分化及成熟及其在小鼠皮肤移植模型应用的实验研究

【作者】 姚立宇； 陈默； 吴昊； 马占川； 傅耀文； 杨永广； 伊焕发；

【机构】 吉林大学第一医院转化医学研究院吉林大学免疫研究所； 吉林大学第一医院小儿外科； 吉林大学第一医院泌尿疾病诊断治疗中心；

【摘要】 背景:树突状细胞（dendritic cells,DC）是重要的抗原呈递细胞（APC）,能够对抗原进行摄取、加工及呈递,能够活化初始T细胞并激发获得性T细胞应答,在感染、肿瘤、移植排斥等免疫反应过程中起重要作用。MS417是近年发现的含溴结构域（Bromodomain and extra-terminal,BET）蛋白的一种新的小分子抑制剂,可暂时性抑制BET蛋白中BRD4基因表达,从而调控NF-κB信号通路,而阻断NF-κB信号可抑制DC成熟,并减轻或预防移植排斥反应,目前关于该小分子对DC的影响尚知之甚少。目的:研究MS417对DC细胞分化、功能及对移植物排斥反应的影响。方法:应用同种异体小鼠皮肤移植模型,供者为Balb/C小鼠,受者为C57BL/6小鼠。实验组小鼠从移植前一天每日尾静脉注射5mg/kg MS417,对照组小鼠给予相同体积溶剂,观察移植皮片的存活;流式分析给药前、移植后第5、10天小鼠外周血DC细胞比例及成熟的影响;应用体外诱导DC分化体系,观察MS417 CD11c⁺细胞比例及共刺激分子表达改变;混合淋巴细胞培养实验检测DC的促抗原特异性T细胞增殖反应。结果:与对照组相比,MS417轻微延长同种异体小鼠皮肤移植物的存活时间,但无统计学意义（MS417 vs Ctr1:中位生存时间14d vs 11.5d,P=0.2402）。移植后第5天及第10天小鼠PBMC中DC细胞比例均较移植前明显增加,但MS417组与对照组相比,DC细胞比例在术后第5天（P=0.0011）及10天（P=0.0017）均明显下降;在体外培养试验中,MS417显著抑制DC的分化,光镜下细胞分散、不成团,CD11c⁺细胞比例减少（P=0.0083）,同时,MS417显著下调DC的MHC II、CD80的表达。分选CD11c⁺负载OVA_323-339肽后,与OT2小鼠淋巴结细胞按不同比例共培养,MS417组CD11c⁺DC促OVA特异性T细胞增殖的功能显著降低（P<0.001）。结论:BET蛋白抑制剂MS417能显著抑制DC的体外分化和成熟,提示MS417处理的DC可能作为诱导移植耐受新的方法。更多还原