胸腺DC来源的IL-27对CD4单阳胸腺细胞功能偏向的影响及其机制

【作者】 张洁； 金容； 张毓；

【机构】 北京大学医学部；

【摘要】 目的:在胸腺髓质区,新产生的单阳性（SP）细胞经历进一步功能成熟成为具有免疫反应性的细胞。与外周初始T细胞相比,CD4SP胸腺细胞及新近迁出胸腺细胞功能上呈现明显的Th2偏向性。这种Th2偏向性形成的机制及其生理意义尚不清楚。前期研究中,我们发现在胸腺DC中特异性删除IL-27p28基因导致CD4SP细胞功能偏向发生改变,表现为IL-4产生减少而IFN-γ产生增加。由此,我们推论胸腺DC来源IL-27在CD4SP细胞功能偏向形成中发挥重要作用。本研究旨探讨胸腺DC来源的IL-27对CD4SP功能偏向形成的影响及其机制。方法:1)应用CD11c-cre p28^flox/flox小鼠,在DC中特异性敲除IL-27 p28亚基,流式分选得到CD4SP、新近迁出胸腺细胞（Recent Thymic Emigrants,RTE）及外周成熟T细胞,在Th0、Th1和Th2条件下培养,通过realtime PCR、流式细胞术及ELISA的方法,比较野生型小鼠及敲除鼠细胞分泌IFNγ和IL-4的能力及相关转录因子的表达差异。2)利用染色质免疫共沉淀方法检测不同小鼠来源细胞中IFNγ和IL-4启动子区组蛋白甲基化和乙酰化修饰的变化,以探讨IL-27调控CD4SP功能偏向的表观遗传学机制。3)利用与Aire-/-小鼠模型探讨Th偏向改变的病理生理意义。结果:与野生型小鼠相比,CD11c-cre p28flox/flox小鼠来源的CD4SP和RTE呈现更强的IFNγ产生能力,而IL-4产生能力减弱。IL-27对这一过程影响主要是通过调控T-bet和Gata3的转录表达以及IFN-γ和IL-4启动子区的表观遗传学修饰来实现的。胸腺细胞功能偏向的改变显著加重了易感小鼠自身免疫病的发生。结论:胸腺DC来源的IL-27通过转录调控和表观遗传调控影响CD4单阳胸腺细胞Th偏向。更多还原