矢车菊-3-O-葡萄糖苷对Aβ_25-35致海马神经细胞损伤的干预研究

【作者】 王舒敏； 庞伟； 卢豪； 李宜波； 郑婷婷； 蒋与刚；

【机构】 军事医学科学院卫生学环境医学研究所；

【摘要】 目的探讨矢车菊-3-O-葡萄糖苷（Cy-3G）的神经保护作用及相关机制。方法原代培养乳鼠海马神经细胞,并进行下述实验。（1）Cy-3G干预浓度的筛选:将细胞分为对照组（不加处理因素）、Aβ_25-35组(5μmol/L Aβ_25-35处理细胞3h)和Aβ_25-35+不同浓度Cy-3G预孵育组(用终浓度分别为10、20、40、60、80、100μmol/L Cy-3G预孵育细胞3h,再加入5μmol/L Aβ_25-35处理细胞3h);乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测细胞活力。（2）Cy-3G干预方式的筛选:将细胞分为对照组、Aβ_25-35组、Aβ_25-35+Cy-3G预孵育组、Aβ_25-35+Cy-3G共孵育组(Aβ_25-35和Cy-3G共孵育3h)和Aβ_25-35损伤后Cy-3G再孵育组(Aβ_25-35孵育3h后再用Cy-3G孵育3h);检测细胞活力的变化。（3）相关机制研究:将细胞分为正常对照组、Aβ_25-35组、Aβ_25-35+Cy-3G共孵育组和Cy-3G组;DCFH-DA探针检测细胞内活性氧（ROS）含量,罗丹明123试剂盒检测细胞线粒体膜电位。结果 （1）40μmol/L Cy-3G与5μmol/L Aβ_25-35共孵育3h保护效果最佳;（2）与对照组比较,Aβ_25-35组细胞上清液中LDH活性明显升高（P<0.05）、线粒体膜电位明显下降（P<0.05）而细胞内ROS水平明显升高（P<0.05）;加入Cy-3G共孵育后可显著降低LDH活性（P<0.05）、抑制Aβ_25-35诱导的海马神经细胞线粒体膜电位的降低（P<0.05）及细胞内ROS水平的升高（P<0.05）。结论适宜剂量的Cy-3G干预对Aβ_25-35损伤的原代海马神经细胞有保护作用,其作用机制可能与抑制氧化应激反应和保护线粒体功能相关。更多还原