【作者】 苏彤； 姚陆铭； 张鑫； 王彪； 武天龙；

【Author】 SU Tong;YAO Lu-ming;ZHANG Xin;WANG Biao;WU Tian-long;School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiao Tong University;

【机构】 上海交通大学农业与生物学院；

【摘要】 基因转化的受体系统是大豆遗传转化的一个重要环节。近年来,国内外不少学者将子叶节、胚尖等作为大豆遗传转化的外植体,但其存在转化株嵌合体多的问题,使后续的筛选不确定性大大增加。本实验采用大豆愈伤作为制备原生质体的材料,与直接从叶片提取原生质体的方法相比,这种方法所获得的原生质体产量与活力较高,而且减少了原生质体植板率、分化效率低的问题。以"交大133"大豆未成熟子叶诱导的愈伤组织为材料,为获得高质量的原生质体,设计正交实验进行了制备过程中的酶解液配比、酶解时间和离心条件方面的研究,得到1%纤维素酶+0.04%果胶酶+1.5%离析酶为最佳的酶解液组成,酶解5 h,100×g离心5 min条件下原生质体数量最佳。在获得高质量的原生质体后,根据卫志明等发表的原生质体经器官发生途径获再生植株的方法进行后续的实验探究,以期建起以愈伤原生质体为外植体适合用于农杆菌介导和基因枪方法进行遗传转化的高频再生体系,为大豆的遗传转化提供高效的再生系统。更多还原