急性子乙酸乙酯提取部对前列腺癌细胞生长抑制作用的机制研究

【作者】 蔡阳； 宋文； 丁玉峰； 王晨； 杨俊； 刘卓； 李明超； 杨竣； 王涛； 王少刚； 刘继红； 叶章群；

【机构】 华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科； 华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科研究所； 华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部；

【摘要】 目的探讨急性子乙酸乙酯提取部对前列腺癌细胞生长抑制作用的机制。方法制备急性子不同提取部位,得到水部、醇部、石油醚部、乙酸乙酯部及正丁醇部。取对数期人前列腺癌细胞株PC-3、RV-1、LNCaP,加入不同浓度(水部、醇部、石油醚部、正丁醇部依次为0.4mg/ml、0.8mg/ml、1.2mg/ml、1.6mg/ml、2.0mg/ml、3.0mg/ml、4.0mg/ml,乙酸乙酯部依次为0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.06mg/ml、0.08mg/ml、0.10mg/ml、0.12mg/ml、0.15mg/ml)的急性子各提取部位,处理24h后通过CCK8法检测各提取部位对PC-3、RV-1、LNCaP的抑制增殖作用,并计算出IC50。经不同浓度乙酸乙酯提取部(0mg/ml、0.04mg/ml、0.08mg/ml)处理24h后,用流式细胞仪检测各细胞凋亡情况以及细胞周期的改变,通过Western blot分析凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、caspase-3)以及p-ERK、p-AKT的表达情况。结果急性子乙酸乙酯部提取物对前列腺癌细胞的抑制增殖作用最强,在一定剂量范围内呈现出剂量依赖性;正丁醇部的作用次之;水部、醇部、石油醚部的抑制增殖作用不明显。急性子乙酸乙酯部提取物对PC-3、RV-1、LNCaP细胞的IC50依次为69μg/ml、32μg/ml、85μg/ml。流式细胞仪检测结果显示,不同浓度的急性子乙酸乙酯提取部作用于PC-3、RV-1、LNCaP细胞24h后,细胞凋亡率随浓度升高而显著升高,G0/G1期细胞比例较空白对照组显著增多(P<0.05);Western blot结果显示,不同浓度的急性子乙酸乙酯提取部作用于PC-3、RV-1、LNCaP细胞24h后,Bcl-2、p-ERK、p-AKT表达降低,Bax、caspase-3活性片段表达升高,且呈浓度依赖性。结论急性子提取物在体外具有抑制人前列腺癌细胞株PC-3、RV-1、LNCaP增殖的作用,其中乙酸乙酯部呈现出较强的抑制作用。其可能通过抑制AKT、ERK信号通路的活化来诱导前列腺癌细胞凋亡,诱导前列腺癌细胞周期阻滞于G0/G1期,进而抑制前列腺癌细胞的增殖。更多还原