三种肝细胞株迁移及侵袭能力的比较

【作者】 刘辉； 朱争艳； 王鹏； 骆莹； 石文霞； 焦晓磊；

【机构】 天津市第三中心医院天津市人工细胞重点实验室天津市肝胆疾病研究所；

【摘要】 目的:比较HL-7702(人正常肝细胞株)、HepG2(肝癌细胞株)、HepG2.2.15(稳定转染乙肝病毒的肝癌细胞株)三种细胞株的迁移及侵袭的能力。方法:以融合度为95%的密度种植三种细胞株于96孔板中,37℃、5%C02培养箱内培养至细胞100%融合,PBS清洗,96-孔划痕器在长满细胞的96孔板固定区域划出约730um宽的伤口,再用PBS清洗孔板,迁移组更换完全培养基,侵袭组板中均匀铺满1:8稀释的matrigel胶,3小时待胶干后再加入完全培养基,将96孔板放入培养箱中的:IncuCyte ZOOM(长时间动态细胞观察及分析系统)数据采集机内进行显微拍照,对三株细胞进行连续监测。通过RWD(相对伤口密度)来比较三种细胞株的迁移能力。结果:迁移组:24小时三组的RWD有显著性差异(P=0.0001),其中HL-7702组显著高于HepG2和HepG2.2.15组(P=0.0001),后两组之间无显著差异(P=0.2576);48小时三组RWD有显著性差异(P=0.0001),其中HL-7702组显著高于HepG2和HepG2.2.15组(P=0.0001),HepG2组显著高于HepG2.2.15组(P=0.0097);72小时三组的RWD有显著性差异(P=0.0018),其中HL-7702组显著高于HepG2和HepG2.2.15组(P=0.0031,P=0.0029),后两组之间无显著差异(P=0.9952);侵袭组:HL-7702组并未发生形变,没有侵袭的现象发生。24小时、48小时及72小时,HepG2与HepG2.2.15两组的RWD均无显著性差异(P值分别为0.889584,0.58572,0.374774)。结论:上述实验结果证明HL-7702细胞株的迁移能力要显著高于HepG2、HepG2.2.15两种肝癌细胞株;HL-7702细胞株虽然是人正常肝细胞株,某些生物学特征属于正常肝细胞,但其永生化后具有无限增殖的能力,并获得了某些肿瘤细胞的生物学特征,如迁移的能力;转染了乙肝病毒的HepG2.2.15并没有明显改变细胞的迁移能力,说明乙肝病毒感染并没有影响肿瘤细胞的迁移能力。虽然HL-7702细胞株的迁移能力要显著高于HepG2、HepG2.2.15两种肝癌细胞株,但是HL-7702细胞株的侵袭能力弱于后两种细胞株,不宜作为对照组,用于肿瘤细胞迁移能力方面的研究。更多还原