牛病毒性腹泻病毒SD15株的分离及序列分析

【作者】 朱利塞； 盖小春； 郭昌明； 邢泽黎； 鲁海冰； 王明月； 涂长春； 王新平；

【机构】 吉林大学动物医学学院； 中国人民解放军军事兽医研究所；

【摘要】 前言牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)属于黄病毒科瘟病毒属成员。该病毒分为两个基因型(BVDV-1和BVDV-2),且每个基因型又可分为不同的基因亚型。根据是否引起感染细胞出现病变,BVDV又分为致细胞病变(CP)和非致细胞病变(NCP)两个生物型。病毒感染后主要引起动物腹泻、黏膜溃烂、流产、产死胎或畸形胎,持续性感染等。本病毒可以感染牛、羊、猪和鹿等野生动物,给养殖业造成极大的经济损失。材料与方法临床呈现腹泻、黏膜渍烂、高发病率和死亡率的牛群病死牛脾脏进行适当处理,接种敏感细胞或提取RNA,以RT-PCR的方法扩增病毒核酸序列,并进行分析。结果与讨论应用BVDV和其它病原体的特异性引物,扩增病料中病原核酸序列,并对扩增片段进行测序、比对分析。结果从病料中扩增出BVDV的特异性序列,确定山东某牛场爆发的疫病的病原体为BVDV。病毒分离结果显示该BVDV毒株(SD15)接种MDBK细胞不引起细胞出现典型的病变,为一株NCP毒株。病毒基因组序列测定与分析揭示,SD15毒株完整基因组序列为12285bp,包括390 bp的5’UTR,193bp的3’UTR和编码3900个氨基酸的前体多聚蛋白的读码框架。SD15核苷酸同源性与国内分离的猪源BVDVZM-95最高,为93.8%,属于BVDV-1m基因亚型;而与国内分离的HLJ毒株(BVDV-2)及JS1201毒株(HoBi-likeBVDV)的同源性分别为70.1%和67.6%。结论确定了山东某地区牛场爆发的疫病为一株NCP BVDV-1m毒株引起。确定了牛源BVDV-1m毒株(SD15)的完整基因组序列,为探讨BVDV的进化及防治提供理论依据。更多还原