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弓形虫胚层发育相关蛋白的原核表达及免疫原性研究
【作者】 宋铭忻； 路义鑫； 韩彩霞； 李巍； 李晓云； 田维鹏；
【机构】 东北农业大学动物医学学院；
【摘要】 试验旨在研究弓形虫胚层发育相关蛋白(TgERP)的免疫原性,以弓形虫RH株的基因组DNA为模板,扩增TgERP基因,将其连接于表达载体pET-30a(+)后,转化至Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞进行IPTG诱导表达,应用Western blotting对重组蛋白的反应原性进行分析,并用纯化后的TgERP蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体。结果显示,在37℃条件下用1.0mmol/LIPTG诱导6h表达可溶性TgERP蛋白的量最大。SDS-PAGE结果显示,目的蛋白分子质量为16.7ku,以可溶形式表达,纯化后蛋白条带单一。经Western blotting分析,TgERP蛋白有较好的反应原性;制备的多克隆抗体效价较高,可达1:51200,表明该蛋白具有较好免疫原性。提示,TgERP蛋白可作为血清学诊断方法的候选抗原和弓形虫病疫苗的候选分子,为建立弓形虫新型诊断方法和研制新型弓形虫疫苗奠定了基础。
【基金】 国家自然科学基金(31230073;31172316);甘肃省创新研究群体计划项目(1210RJIA006)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
- 【会议时间】2015-07-25
- 【会议地点】中国黑龙江哈尔滨
- 【分类号】S852.7
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会