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椰子泻血病菌Ceratocystis paradoxa的绿色荧光蛋白标记
【机构】 中国热带农业科学院椰子研究所海南省热带油料作物研究中心； 福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室；
【摘要】 椰子泻血病是海南椰子树的重大病害,其病原为奇异长喙壳菌(Ceratocystis paradoxa)。通过溶壁酶酶解菌丝体成功制备奇异长喙壳菌原生质体,用抗潮霉素基因作为选择标记,采用PEG介导的原生质体转化法,用绿色荧光蛋白表达载体(pCT74-sGFP)转化原生质体,获得表达GFP奇异长喙壳菌的转化子菌株;转化子菌株在含潮霉素平板上经多次纯化后,在无选择压下连续继代培养仍能发出稳定而强烈的绿色荧光。用GFP特异性引物PCR扩增转化子菌株基因组DNA获得预期大小片段,表明外源基因已成功导入奇异长喙壳菌基因组中,且稳定遗传;GFP标记菌株生长正常,致病性和野生型菌株无明显差别。今后将利用该标记菌株,进一步研究奇异长喙壳菌在植物体内的侵染和扩增特性,为最终明确该病菌的致病机制奠定基础。
【关键词】 椰子泻血病；
奇异长喙壳菌；
绿色荧光蛋白基因:转化；
【基金】 海南省应用技术研发与示范推广专项(ZDXM2015024)
- 【会议录名称】 植保科技创新与农业精准扶贫——中国植物保护学会2016年学术年会论文集
- 【会议名称】中国植物保护学会2016年学术年会
- 【会议时间】2016-11-10
- 【会议地点】中国四川成都
- 【分类号】S436.67
- 【主办单位】中国植物保护学会