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非对称场流分离在生物大分子分离表征中的应用

Application of Asymmetrical Flow Field Flow Fractionation for Separation and Characterization of Biomacromolecules

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【作者】 窦海洋王静李月秋张晶丁良申世刚

【Author】 Haiyang Dou;Jing Wang;Yueqiu Li;Jing Zhang;Liang Ding;Shigang Shen;School of Medicine, Hebei University;College of Chemistry and Environmental Science, Hebei University;

【机构】 河北大学医学院河北大学化学与环境科学学院

【摘要】 非对称场流分离技术(AF4)是一种基于样品与外力场相互作用机理的分离技术[1]。不同于高效液相色谱,AF4池道中没有固定相和填充材料,这决定了AF4具有广泛的检测范围(103-1018g/mol),并适用于剪切力敏感的生物样品的分离。AF4池道的独特设计使分析载液具有广泛的选择性,允许对样品进行原位分析,收集的AF4样品片段可用于其他分析手段的离线或在线分析。另外,根据AF4理论[2,3],AF4与一些检测器串联可以同时提供样品的粒径分布图。本项目通过AF4与多角光散射检测器(MALS)、示差折光检测器串联研究了发芽时间对大麦中淀粉物化性质的影响。通过体内体外实验研究了发芽大麦中淀粉物化性质和抗糖尿之间的相关性。结果发现,经过简单的发芽处理,淀粉表观密度和抗糖尿活性有所增加。另外,本项目通过AF4与紫外可见检测器(UV/VIS)、MALS和荧光检测器串联分离表征了鸡蛋蛋黄中的脂蛋白。结果证明了AF4多检测器串联技术是一种高效的生物大分子分离表征手段。

【Abstract】 Unlike HPLC, the separation mechanism of asymmetrical flow field flow fractionation(AF4) is based on the interaction of sample and external force. AF4 has a broad determination range(1nm-100μm) due to the utilization of ‘open channel’ which requires no stationary phase or packing materials. The sample degradation is minimized in AF4. Another main advantage of AF4 is the wide choice of carrier liquid which allows for the analysis of a sample in situ. Moreover, AF4 can provide the size distribution of sample in a single run. In the present study, AF4 coupled with UV/VIS, DRI, multiangle light scattering(MALS), fluorescence(FS) was employed for the separation and characterization of germinated barley starch and egg yolk plasma. It was found that, when germinated, the apparent density and the antidiabetic activity of barley were significantly increased. The results show that AF4-UV/VIS-MALS-DRI-FS is a powder tool for the separation and characterization of biomacromolecules.

【关键词】 非对称场流分离分离表征淀粉脂蛋白
【基金】 河北省自然科学基金B2016201002;河北省高等学校学科技术研究项目(QN2016081);河北省医学学科研究重点课题(20160048);保定市科学研究与发展计划项目(15ZG049);河北大学中西部提升综合实力专项资金的支持
  • 【会议录名称】 中国化学会第30届学术年会摘要集-第二分会:分析装置及交叉学科新方法
  • 【会议名称】中国化学会第30届学术年会
  • 【会议时间】2016-07-01
  • 【会议地点】中国辽宁大连
  • 【分类号】O652.6
  • 【主办单位】中国化学会
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