生物质谱分析方法用于豚鼠血清中N-聚糖的测定研究

【作者】 易晨； 刘欣；

【机构】 华中科技大学生命科学与技术学院生物医学工程系；

【摘要】 N-聚糖在很多生理活动的过程中起着重要的作用,所以对于N-聚糖的检测具有很重要的意义,天然糖类在质谱中的信号响应不是很理想,全甲基化是目前加强糖类在质谱中的信号强度比较常用的衍生方法,但是这种方法的缺陷就是在碱性环境下可能会导致糖链降解或者是唾液酸上的其他基团被破坏。甲胺化是一种比较温和的糖类衍生方法,它能对唾液酸结构进行修饰提高检测信号而不破坏唾液酸上其他基团,这正好弥补了全甲基化的缺陷。豚鼠是较早应用于生物医学研究的动物,豚鼠对多种病原体敏感,并且血清中含有丰富的补体,是很好的免疫学和病理学研究的实验材料,对于豚鼠血清的研究可以为一些病理研究提供相应的生物学指标。本文以豚鼠血清中的糖类为研究对象,对其进行全甲基化和甲胺化衍生,然后通过MALDI-MS进行检测,研究发现全甲基化的N-糖能准确鉴定的糖结构数目为33个,而甲胺化中能准确鉴定的N-聚糖结构数目为46个,比全甲基化多出了13个含有O-乙酰化的唾液酸糖结构。基于以上实验基础,本文又利用液质联用技术(LC-ESI)对甲胺化的豚鼠血清糖类进行了检测分析,我们得到了O-乙酰化的唾液酸糖的色谱峰和二级图谱,经研究发现,O-乙酰化的唾液酸糖的出峰时间明显后延,并且O-乙酰化后的唾液酸糖的同分异构体数目明显增加。本文的研究表明豚鼠血清中唾液酸糖的O-乙酰化程度对于某些病理学研究是较好的生物标记物。更多还原