2,5-己二酮染毒对大鼠坐骨神经Schwann细胞中S100B的影响

【作者】 姚文环； 颜燕； 杨非； 周雯； 程东； 李慧； 张天亮；

【机构】 山东省疾病预防控制中心；

【摘要】 【目的】初步观察2,5-己二酮（2,5-hexanetione,HD）HD染毒大鼠感觉运动型多发性周围神经病变时坐骨神经Schwann细胞（SC）中特异性反映其功能和活化状态的S100B蛋白与mRNA表达变化,为HD导致的感觉运动型周围神经病变的发生、发展、控制提供理论依据。【材料和方法】SPF级健康Wistar雄性大鼠随机分为低和高2个剂量组,分别为100和300 mg/（kg.d）,同时设生理盐水对照组。将HD溶于生理盐水中,经腹腔注射染毒,每周染毒5 d,每日1次,连续8w（经神经行为学测定模型建立成功）。处死一半动物并分离、保存坐骨神经,用于电镜观察以及构成S100B蛋白的亚基S100β免疫组化测定、实时荧光定量PCR（RT-PCR）测定。免疫组化图片经3D HISTECH数字切片扫描系统扫描、200倍截图后,采用Image-Pro Plus分析软件分析积分光密度（IOD）值,并用SPSS软件进行统计学处理。RT-PCR中计算基因表达相对量2^-△△Ct。另一半动物停止染毒、自然恢复8w后取材。【结果】高剂量组动物染毒后第3w起皮毛不光滑、色黄、稀疏等异常,活动减少,体重增长缓慢或负增长,行走步态异常,后肢瘫痪等。第4w起动物后肢尾部热痛觉敏感度降低,后肢足跖压痛觉、后肢热痛觉痛觉阈值升高。第9w停止染毒后,中毒症状逐渐减轻,但未完全恢复。低剂量组动物中毒表现相对较轻,但后肢无瘫痪发生,停止染毒后基本恢复。电镜检查可见对照组髓鞘厚薄较均一、形态较相近,无髓鞘脱落、轴索肿胀。实验组染毒8w时髓鞘厚薄不均、大小不一、板层紊乱、形态各异,部分髓鞘中间脱落、向轴突内部突起或轴索肿胀。染毒8w时100和300mg/（kg.d）剂量组中S100β表达量分别为对照组的99%和122%,染毒终止、恢复8w后为177%（p<0.05）和259%（p<0.01）。染毒8w时S100βmRNA表达水平均降低,为对照组的0.60和0.51倍,染毒终止、恢复8w后分别为1.36和0.66倍。【结论】HD染毒大鼠中毒性周围神经病变坐骨神经SC中S100B蛋白表达发生明显变化,且变化和挤压、离断等方式导致的急性周围神经损伤过程中S100B的变化以不一致,提示慢性、亚慢性暴露发方式不同于急性损伤,其S100β蛋白含量变化与mRNA表达不一致。更多还原