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黄连素依赖于YAP1调节脂素的表达降低细胞TAG水平
【机构】 东华大学生物技术研究所； 华东理工大学生物工程学院；
【摘要】 甘油三酯(TAG)的合成与动员是能量平衡调节的主要环节,调节失衡是诱发肥胖的主因,但有关肥胖的细胞分子机理至今仍然很不清楚,而且目前缺乏有效的治疗药物。酿酒酵母和人甘油三酯合成和分解途径十分相似。针对TAG代谢通路中的关键步骤,通过遗传学技术调节PAH1、TGL3、TGL4基因的表达,改变细胞脂素和/或水解酶的水平构建一系列"肥胖"酵母模型。应用该肥胖细胞模型,我们研究了盐酸黄连素、盐酸普洛萘尔、盐酸克伦特罗对细胞TAG的合成与动员的调节作用,发现三种化合物均有一定的降脂活性,而且具有脂素基因PAH1依赖关系,但三种药物作用机制是不同的,深入研究发现0.5g/L黄连素处理显著降低了PAH1的mRNA和蛋白水平(p<0.01);对PAH1启动子区域的结构分析,遗传研究证明黄连素在YAP1缺陷菌株yapl△中失去对PAH1调控作用,进一步片段化研究PAH1启动子区的-764~-757bp序列的ARE结合位点在黄连素抑制PAH1表达中起关键作用;YAP1-YFP/GFP细胞荧光显微定位分析,黄连素处理影响Yaplp细胞核富集,Western-blot结果也显示黄连素有效的抑制Yaplp的磷酸化。结果显示黄连素依赖转录因子YAP1调节脂素的表达降低细胞TAG水平。酿酒酵母是研究TAG代谢基因调节机制的有益模型,相关研究为寻找针对脂类代谢关键酶具有靶向调控作用的先导药物具有理论指导意义。
- 【会议录名称】 中国药学会生化与生物技术药物专业委员会2015年学术年会暨抗体药物研发高峰论坛会议手册
- 【会议名称】中国药学会生化与生物技术药物专业委员会2015年学术年会暨抗体药物研发高峰论坛
- 【会议时间】2015-10-17
- 【会议地点】中国山东烟台
- 【分类号】R96
- 【主办单位】中国药学会、中国药学会生化与生物技术药物专业委员会