CD137共刺激分子增强靶向LMP1嵌合抗原受体T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用

【作者】 唐小军； 周焱； 唐奇； 陈仁杰； 朱进； 冯振卿；

【机构】 南京医科大学病理学系 卫生部抗体技术重点实验室； 江苏省张家港澳洋医院； 南京医科大学第二附属医院； 南京军区军事医学研究所； 江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心；

【摘要】 EB病毒目前已经证实与多种肿瘤发生密切相关,包括伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、胃癌以及淋巴细胞增生症。虽然EB病毒特异的CTL细胞在治疗EB病毒相关的淋巴细胞增生症中取得很好的疗效,但是由于EB病毒相关肿瘤下调EB病毒相关蛋白,从而使得EB病毒特异的CTL细胞治疗EB病毒相关肿瘤疗效欠佳。EB病毒相关肿瘤中LMP1的表达与肿瘤的转移等相关,通过构建靶向LMP1的嵌合抗原受体(CAR)T细胞,可以识别并杀伤表达LMP1的肿瘤细胞。本文构建了第二代靶向LMP1的CAR分子(HELA/CAR),研究结果表明HELA/CAR能够特异性识别并杀伤LMP1表达阳性的鼻咽癌细胞。为了进一步增强HELA/CAR的功能,本文在HELA/CAR分子的信号分子区插入免疫共刺激分子CD137的胞内序列,构建第三代CAR分子(HELA/137CAR),通过慢病毒包装成携带HELA/137CAR的慢病毒,感染经抗CD3抗体激活的人CD3+T细胞,获得HELA/137CAR T细胞。研究结果表明,HELA/137CAR T细胞能特异性识别并明显杀伤LMP1表达阳性的鼻咽癌细胞,通过ELISA及流式细胞术检测证明HELA/137CAR T细胞在LMP1抗原刺激下能够比HELA/CAR T细胞释放更多的IFN-γ及IL-2细胞因子。体内试验证明HELA/137CAR T细胞比HELA/CAR T细胞有更强的抑制肿瘤生长的效果,免疫组化结果显示在肿瘤组织中含有更多的HELA/137CAR T细胞。本文研究结果提示CD137分子能够促进CART细胞在体内增殖或增强其归巢到肿瘤组织的能力,从而表现出更好的抗肿瘤效果。更多还原