苦参碱对人髓母细胞瘤D341细胞的诱导凋亡及自噬作用

【作者】 周开宇； 吉海龙； 白志强； 罗永康；

【机构】 台州学院医学院附属台州市立医院神经外科； 上海复旦大学附属华山医院台州分院； 温州医科大学附属第一临床学院；

【摘要】 目的研究苦参碱在体外对人髓母细胞瘤D341细胞凋亡与自噬相关蛋白表达的变化。方法体外培养的D341细胞分为实验组、对照组,实验组按所加苦参碱浓度的不同分组,对照组不加苦参碱,透射电镜观察细胞形态结构改变,用CCK-8法检测苦参碱对D341细胞的增殖,Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测苦参碱对D341细胞Caspase-3、Caspase-9、LC3、Beclinl蛋白的表达,并观察使用自噬抑制剂3-MA(3-甲基腺嘌呤,3-methyl adenine)后Beclin1、LC3表达水平的变化。结果在透射电镜下观察,细胞可见染色质趋边固缩,胞浆中空泡变大、增多;苦参碱在体外能明显地抑制D341细胞的生长和促进凋亡,作用呈量-效与时-效关系;苦参碱能使瘤细胞的Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达水平增强;使Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的表达水平增加,LC3-Ⅰ蛋白的表达水平降低,使用3-MA却能抑制苦参碱对D341细胞Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平的作用。结论苦参碱在体外通过诱导瘤细胞凋亡、促进自噬而发挥抑制D341细胞的增殖。更多还原