靶向抑制Glut-1及PI3K/Akt信号通路提高喉癌放射敏感性体内研究

【作者】 鲍洋洋； 周水洪； 雒星梅； 陆中杰； 范骏； 王勤瑛；

【机构】 浙江大学医学院附属第一医院耳鼻咽喉科头颈组； 山西省人民医院耳鼻咽喉科； 浙江大学医学院附属第一医院放疗科； 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室；

【摘要】 目的:在前期体外实验的基础上,进一步检测反义寡核苷酸Glut-1(Glut-1 AS-ODN)在体内对实体瘤的治疗效果,明确喉癌放射抵抗与Glut-1表达增高有关;并研究LY29400、wortmannin和apigenin等抑制剂阻滞PI3K/Akt信号通路,降低喉癌细胞中Glut-1表达,明确喉癌细胞中PI3K/Akt信号通路调控Glut-1表达对喉癌放射敏感性的影响及机制,为将来临床喉癌患者喉功能保留治疗提供坚实的理论基础。方法:在BALB/c-nude裸鼠建立了Hep-2喉癌细胞的移植瘤模型,分成对照组,LY294002组,wortman原nin组,反义Glut-1组,apigenin组,单纯10Gy照射组,LY294002组+反义Glut-1组,wortmannin组+反义Glut-1组,apigenin组+反义Glut-1组,LY294002组+反义Glut-1组+10Gy,wortmannin组+反义Glut-1组+10Gy,apigenin组+反义Glut-1组+10Gy,LY294002组+10Gy,wortmannin组+10Gy,检测各组瘤体的变化,并通过反义GLUT-1抑制Glut-1表达、LY29400、wortmannin和apigenin等抑制剂阻滞PI3K/Akt信号通路,分别通过实时RT-PCR、Western blotting各组GLUT-1、AKT、PI3K、CD133 m RNA以及蛋白的表达情况、TUNEL检测裸鼠瘤体组织的细胞凋亡水平。结果:反义GLUT-1、LY29400、wortmannin和apigenin等抑制肿瘤生长,并能增强X线对瘤体的抑制作用,分别通过抑制GLUT-1、AKT、PI3K、CD133表达以及增加细胞凋亡来增强X线的作用。结论:靶向抑制Glut-1及PI3K/Akt信号通路能提高喉癌致瘤裸鼠的放射敏感性更多还原