猪源氟喹诺酮耐药大肠杆菌通过接合水平传递耐药性的研究及接合子PMQR基因的检测

【作者】 王宏栋； 徐国锋； 矫薇薇； 张秀英；

【机构】 东北农业大学动物医学学院；

【摘要】 为了研究猪源大肠杆菌中可移动质粒在耐药性水平传播机制中的作用,本文在前期实验基础上,对氟喹诺酮耐药且PMQR基因阳性的大肠杆菌进行接合实验,并对所得接合子采用微量肉汤稀释法测定其对8种常见药物的最小抑菌浓度(MIC),比较接合前后耐药表型的变化,针对质粒介导的氟喹诺酮耐药基因(PMQR)设计特异性引物对接合子进行PCR检测。结果显示,41株氟喹诺酮耐药且PMQR基因阳性的供体菌共接合成功16株细菌,接合成功率高达39%,通过测定MIC值可以发现,接合子与受体菌J53相比,均呈现一定的耐药表型,与供体菌相比,87.5%的接合子存在耐药谱型的变化,并且存在丢失一种药物耐药性,产生另一种药物耐药性的现象。PCR结果表明,接合子与供体菌相比,基因型有所减少,这表明在不同的PMQR基因在可移动质粒介导耐药性水平传播的过程中接合成功率存在差异,不同的PMQR基因有可能位于不同的可移动质粒上,接合子中qnrS基因接合成功率最高,oqxA和oqxB位于同一个可移动质粒中发生共转移,12.5%的接合子发生了oqxA、oqxB和qnrS的共转移,提示这三个基因可位于同一个可移动质粒中,以上结果均表明,通过比较接合前后供体菌和受体菌耐药表型的变化,尤其是PMQR基因检出率的变化,可以初步确定,可移动性质粒在大肠杆菌耐药性水平传播的过程中起到了非常重要的作用。更多还原