没食子酸对温和气单胞菌及嗜水气单胞菌的抑菌活性及作用机制研究

【作者】 卢静； 王振宁； 任梦柔； 黄国任； 房宝晨； 卜秀娟； 关爽； 邓旭明；

【机构】 动物医学学院吉林大学；

【摘要】 【目的】嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)及温和气单胞菌(Aeromonas sobria)是常见的兼性厌氧型食源性致病菌,是造成食品腐败的微生物之一。没食子酸是一种具有良好抗氧化活性和抑菌活性的天然活性物质,经常用于食品贮藏保鲜,但是没食子酸能否抑制气单胞菌进行贮藏保鲜的相关研究尚未见报道。因此,本文以嗜水气单胞菌及温和气单胞菌为研究对象,考察没食子酸的抑菌活性及其作用机制,以期为没食子酸在食品贮藏保鲜方面的应用奠定理论基础。方法本研究首先通过抑菌圈试验、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验,考察了没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌的抑菌活性。然后通过以下实验进一步探讨了没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌的抑菌机制:没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌杀菌曲线、没食子酸对OD260和OD280值的影响、没食子酸对电导率的影响、扫描电镜观察没食子酸对细菌外观结构形态的影响以及SDS-PAGE凝胶电泳。【结果】没食子酸(12 mM)对嗜水气单胞菌和温和气单胞菌的抑菌圈直径分别为26.3±0.44mm和24.06±0.04mm,没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌的MIC和MBC均为0.15 mM。没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌的抑菌机制研究结果如下,随着没食子酸浓度增大,杀菌能力增强,杀菌时间缩短;OD260和OD280值呈剂量-依赖性增大;在一定时间内电导率呈剂量-依赖性增大;扫描电镜结果显示,没食子酸浓度越大,菌体内膜凹陷越严重,形态越不规则,数量越少;电泳结果显示,相较空白组,没食子酸组随着浓度增大,更多的蛋白条带减弱甚至消失。结论没食子酸对嗜水气单胞菌及温和气单胞菌均有显著抑制作用,其可能的抑菌机制是通过破坏细胞膜完整性,使得核酸、蛋白质类物质、离子等细胞内容物溶出,导致细胞死亡,从而起到抑菌作用,SDS-PAGE凝胶电泳结果进一步证实了没食子酸能够影响细胞蛋白。本研究为没食子酸在贮藏保鲜中的运用,抑制食品中食源性致病菌,保障食品安全提供理论依据。更多还原