双峰驼CYP1A亚酶体外活性研究

【作者】 何兴瀚； 哈斯苏荣；

【机构】 内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室； 内蒙古骆驼研究院；

【摘要】 为探究双峰驼CYP1A酶体外活性及其对外源性药物代谢的影响,首先采用差速离心法制备双峰驼肝微粒体,并优化其体外孵育体系,然后采用高效液相色谱紫外检测法测定双峰驼肝微粒孵育体系中CYP1A酶特异性底物非那西丁的代谢产物对乙酰氨基酚的动态含量,并借助Origin Pro8.6软件计算出CYP1A的酶动力学参数。结果表明,双峰驼肝微粒体具有良好的酶活性,其蛋白含量为1.652±0.341 mg/g。经优化后孵育体系的最适宜底物浓度为200μg/mL,最佳肝微粒体浓度为4.95 mg/mL,最适宜孵育时间为30min。双峰驼CYP1A酶体外孵育体系最大反应速度Vmax为0.2246±0.0418nmol/min/mg,米氏常数Km为5.5779±0.6342μmol/L,内在代谢清除率CLint为0.0804±0.0231 mL·min/mg。因此,本文通过借助特异性探针药物动力学特征的研究,成功检测了双峰驼CYP1A酶体外代谢活性。更多还原