治疗鸡大肠杆菌病的中药复方石诃颗粒可通过抑制TLR4-NF-κB通路发挥抗炎作用

【作者】 种新禄； 刘晓曦； 陈佳佳； 于晓红； 程鹏； 许剑琴； 刘凤华；

【机构】 北京农学院动物科学技术学院； 中国农业大学动物医学院；

【摘要】 引言石诃颗粒(SHKL)(本实验室研制)。前期试验结果表明,SHKL具有很强的抗菌、抗炎和收敛止泻的作用,而且对鸡大肠杆菌病也有很好的治疗效果。目的探讨在鸡大肠杆菌病模型中,SHKL对TLR4-NF-KB炎症通路的影响,进而阐明SHKL的作用机制。材料方法腹腔注射大肠杆菌02(2.5×10~8 cfu/只),建立鸡大肠杆菌病模型,攻毒后12h,灌服SHKL(1.0g/kg.bw),每12 h给药1次,分别在攻毒后24h、72h、120h采取回肠组织,采用石蜡切片HE染色观察回肠组织炎性损伤,荧光定量PCR方法检测回肠组织中TLR4、NF-κB1(p50)和前炎性因子IL-1β、TNF-α的mRNA表达;ELISA方法检测回肠组织中前炎性因子IL-1β、TNF-α蛋白的表达。结果感染后24 h,回肠绒毛固有层边缘可见大量炎性细胞堆积和充血现象;感染后72 h和120 h,可见肠绒毛固有层大量炎性细胞堆积和充血,并出现肠黏膜上皮细胞脱落,固有层裸露;治疗组除轻微充血外,炎性细胞堆积、固有层裸露现象基本消失。与对照组相比,模型组攻毒后24h、72h、120h,TLR4、NF-κB1(p50)、IL-1β、TNF-αmRNA表达均显著升高(P<0.05),其中IL-1β在24h表达量最高,TLR4、NF-κB1(p50)、TNF-α在72h表达量最高。蛋白水平几-1β持续120h表现高表达(P<0.05),TNF-α蛋白在72h表达最高(P<0.05)。治疗组与对照组相表达差异不显著。结论TLR4-NF-κB炎症通路在鸡大肠杆菌病模型中,攻毒24h后被明显激活,该通路激活后引起下游前炎性因子IL-1β、FNF-αmRNA和蛋白水平表达升高,SHKL能显著抑制TLR4-NF-κB炎症通路的激活,降低下游炎性因子的表达,减轻炎性损伤,进而达到治疗目的。更多还原