转基因公羊繁殖性能安全评价研究

【作者】 蔡文涛； 苏文龙； 房义； 张效生； 张金龙； 孙树春； 冯建忠； 李俊杰； 朱士恩；

【机构】 河北农业大学动物科技学院； 中国农业大学动物科技学院； 天津市畜牧兽医研究所； 河北省牛羊胚胎工程技术研究中心；

【摘要】 类Toll受体(Toll-1ike receptors,TLR)可以识别侵入体内的微生物进而激活免疫细胞的应答,被认为在先天性免疫系统中起关键作用;VP1是口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)的前体多聚蛋白裂解后形成的一种结构蛋白,它具有与细胞受体结合的功能,是病毒感染细胞的关键因素。因此转TLR和VP1基因羊可以有效地减少外界病菌对其自身的侵染能力。但外源基因的导入有可能对转基因动物的生存竞争能力和环境的适应性产生不利影响,而转基因动物的繁殖能力与上述指标密切相关。为此,本实验以天津市畜牧兽医研究所抗病转基因雄性绵羊为材料,评价外源基因的导入对转基因公羊繁殖状况的影响。试验共分为4组,包括转TLR基因羊、转VP1基因羊、转基因阴性羊和非转基因羊,采用常规镜检、酶联免疫、流式细胞仪等方法,从精液品质、精浆生化指标、精子细胞凋亡率等方面系统评价转基因公羊的繁殖能力是否正常。结果表明:(1)常规镜检精子密度、活精子百分数及精子呼吸强度均差异不显著(P>0.05);(2)精浆锌、中性α-葡萄苷酶、酸性磷酸酶、果糖及精浆ATP含量均差异不显著(P>0.05);(3)精子细胞凋亡率转TLR组(11.35±1.47%)、转VP1组(11.31±0.95%)与阴性对照组(10.19±0.80%)、空白对照组(8.25±0.75%)均差异不显著(P>0.05);(4)采用流式细胞仪检测精子活率、线粒体膜电位、质膜完整率、顶体完整率四项指标,转TLR和转VP1组与转基因阴性组、对照组均差异不显著(P>0.05)。以上结果表明:转基因羊与非转基因羊的精液品质、精浆生化指标、精子细胞凋亡率、精子质膜完整率、线粒体膜电位等均差异不显著。可见,外源基因TLR和VP1的导入对转基因公羊的繁殖性能未产生不利影响。更多还原