板栗疫病菌类枯草杆菌蛋白酶Prb1的功能研究

【作者】 施李鸣； 李茹； 廖素环； 白凌云； 陈保善；

【机构】 广西大学生命科学与技术学院； 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室；

【摘要】 板栗疫病菌是引起板栗疫病的病原真菌。类枯草杆菌蛋白酶在生物体内广泛存在,而且和病原真菌的致病力相关。本研究克隆表达了板栗疫病菌编码类枯草杆菌蛋白酶的基因prb1,并纯化了Prb1蛋白,测定其具有蛋白酶的活性。为了研究Prb1在板栗疫病菌中的功能,我们构建了prb1基因的缺失突变体Δprb1及其互补转化株Δprb1-com。与野生型EP155相比,Δprb1菌株表现为气生菌丝减少,分生孢子产量减少,致病力显著下降,总蛋白酶活力下降60%。另外,Prb1蛋白的定点突变试验显示D195,H227和S393三个位点对Prb1的功能至关重要。prb1基因的缺失导致参与G蛋白信号传导途径的cpga1,cpgb1,cpgc1和ste12基因转录水平明显下调。而且,缺失prb1还导致真菌自噬体的明显聚集。本研究结果表明prb1基因编码的蛋白酶在调控板栗疫病菌的致病力、生长特性及自噬方面都有重要作用,为阐明真菌致病及自噬机制提供了新的知识。更多还原