萹蓄炭疽病病原菌分离与鉴定

【作者】 刘丽萍； 靳晓山； 杨梁玉； 刘正慧； 李玉； 高洁；

【机构】 吉林农业大学；

【摘要】 篇蓄(Polygonum aviculare L.)又名萹竹,蓼科的一年生草本植物,生长于田野路旁,嫩叶可人药,有利尿,抗菌,降压等作用。笔者于2014年在吉林农业大学校园内及家属蔬菜种植区内发现一种影响萹蓄生长的病害,该病害主要为害萹蓄叶片,叶片上病斑大小1-3mm,病斑初呈圆形,中间黄褐色,边缘紫红色,一般叶片上会出现多个病斑(1-15个),严重时病斑汇合,造成叶片枯死。本研究对萹蓄炭疽病的病原菌进行分离培养、致病性测定,并结合形态学特征和分子生物学技术对病原菌进行鉴定。试验结果表明,该菌在potato dextrose agar(PDA)平板上,菌落圆形,边缘整齐,气生菌丝初为白色,后从菌落中央开始渐变为浅灰色,菌落背面略呈紫红色,菌落培养后期产生菌核。该菌在synthetic nutrient-poor agar(SNA)平板上,菌丝稀疏,产生大量附着胞,附着胞棕色,卵圆形至不规则形,边缘整齐或轻微不规则缺裂,5.9~18×4.6~8.4μm(n=120);分生孢子新月形,两端稍尖,无色单胞,18.3~30.6μm×2.9~5.6μm(n=120)。参照Damm,U.et al.2009年在Fungal Diversity上发表的关于《Colletotrichum species with curved conidia from herbaceous hosts》及《真菌鉴定手册》的描述,该病原菌的形态、大小与黑线炭疽菌(Colletotrichum dematium.)相似。此外,将病原菌CCPA14的DNA通过多引物(rDNA-ITS、β-Tub2、.ACT、SOD2、GAPDH、CHS-1)PCR扩增后,对扩增产物进行测序,对分别获得的DNA片段序列与GenBank中核酸数据进行Blast,均与已报道的黑线炭疽菌(C.dematium)的序列同源性最高,相似性均达98%以上。结合形态学与分子生物学鉴定结果,将该病原菌鉴定为黑线炭疽菌(C.dematium)。更多还原