灰飞虱NADPH-细胞色素P450还原酶基因克隆及抗性功能分析

【作者】 张月亮； 刘宝生； 张志春； 王利华； 姚静； 郭慧芳； 方继朝；

【机构】 江苏省农业科学院植物保护研究所；

【摘要】 细胞色素P450在昆虫对外源化合物解毒代谢过程中发挥着非常重要的作用,而NADPH-细胞色素P450还原酶是细胞色素P450参与各种氧化还原反应的核心电子供体,灰飞虱(Laodelphax striatellus)是水稻上一种主要的农业害虫,其不仅刺吸为害还传播多种病毒病。研究发现灰飞虱对杀虫剂抗药性的产生是其种群暴发的一个重要因子,噻嗪酮是一种昆虫生长调节剂,长期以来其对稻飞虱若虫具有优异的防控效果,但近几年来田间监测表明不同地理种群灰飞虱已对噻嗪酮产生了不同程度的抗性。因此,对灰飞虱NADPH-细胞色素P450还原酶基因克隆及抗性功能分析能为有效控防灰飞虱提供理论基础。本研究发现,200ng/μL喂饲法在第五天能有效干扰灰飞虱若虫NADPH-细胞色素P450还原酶基因表达量,且重复间稳定性较强。此剂量RNAi对灰飞虱致死效应不明显,但能显著降低灰飞虱的发育进度,且在此剂量干扰后,灰飞虱噻嗪酮抗性品系敏感下降倍数显著高于敏感品系。而在第3、第5和第7天50ng/μL喂饲对NADPH-Cytochrome P450reductase基因表达量抑制作用不明显,且出现一定的技术重复不稳定性。值得注意的是以500 ng/μL喂食显示在不同干扰时间表达量逆增长的趋势,此原因有可能是外在超负荷胁迫因子刺激昆虫应激免疫反应。更多还原