人工合成甘露多糖复合物的免疫原性及其诱导产生抗体对念珠菌的识别能力

【作者】 潘搏； 潘炜华； 廖万清； 廖俊； 吴秋业；

【机构】 第二军医大学长征医院皮肤科； 上海市医学真菌研究所； 第二军医大学药学院有机教研室；

【摘要】 模拟白念珠菌细胞壁甘露聚糖结构,人工合成甘露二糖、甘露三糖和甘露四糖与/不与KLH相连的糖肽复合物。评价这些复合物对小鼠免疫原性和其诱导小鼠产生的抗体对念珠菌的识别能力。以雌性BALB/c小鼠为免疫对象,采用皮下免疫的方式进行免疫,四次免疫完成后进行眶静脉取血和念珠菌攻毒实验。利用ELISA方法检测血清中甘露多糖特异性IgG抗体滴度,并利用流式细胞和免疫荧光方法检测小鼠血清中抗体IgG对白念珠菌和其他念珠菌的识别情况。最后,对白念珠菌攻毒小鼠的生存情况进行统计分析。结果发现,与KLH相连的甘露多糖糖肽复合物可以在没有佐剂的情况下诱导小鼠产生相应的甘露多糖抗体。未与KLH相连的甘露多糖,即使联合弗氏佐剂皮下免疫小鼠,也不能使小鼠产生相应的甘露多糖抗体。甘露三糖和甘露二糖诱导小鼠产生的IgG抗体可以识别白念珠菌酵母相和假菌丝相。针对甘露三糖的抗体IgG的识别能力优于甘露二糖特异性抗体IgG。针对甘露三糖的抗体IgG还可以识别热带念珠菌、葡萄牙念珠菌和光滑念珠菌,但不能识别近平滑念珠菌和克柔念珠菌。甘露四糖诱导产生的特异性抗体并不能识别这些念珠菌。与KLH相连的甘露三糖免疫组可以显著延长白念珠菌攻毒小鼠的生存时间,而甘露二糖和甘露四糖糖肽疫苗并不能延长感染小鼠的生存时间。更多还原