基于电喷雾电离质谱分析的人肝癌细胞HepG2与正常肝细胞L02O-糖链的定性定量比较

【作者】 潘丽英； 王承健； 孙玉姣； 刘洋； 王仲孚； 黄琳娟；

【机构】 西北大学生命科学学院,西部资源生物与生物技术教育部重点实验室；

【摘要】 糖基化是蛋白质翻译后修饰最重要的形式之一,据估计存人体内超过50%的蛋白质发生了糖基化^[1]。蛋白质糖基化主要分为N-糖基化和O-糖基化两种类型。糖基化异常在癌症生物学中的重要作用已逐渐得到认识^[2,3]。最近几年,利用糖组学分析方法寻找各种癌症的糖链生物标志物已成为糖生物学研究的热点。随着生物质谱技术的迅速发展及其在糖组学和蛋白质组学研究中的广泛应用,为特异性更高的糖链生物标志物的筛选提供了可能^[4,5]。本研究以人的原发性肝癌细胞HepG2和正常肝细胞L02为研究对象,从两种细胞系中提取总蛋白,然后用还原性β-消除^[6]释放O-糖链,采用电喷雾电离质谱（ESI-MS）和串联质谱（MS/MS）对分离纯化后的O-糖链进行序列鉴定,以β-环糊精作内标对两种细胞系的N-糖链进行定量比较分析。如图1所示,肝癌细胞HepG2中检测到10种O-糖链,L02中检测到9种O-糖链,发现HepG2中存在癌细胞中特有的缩短的O-糖链N1A1（NeuAc-GalNAc,sialyl Tn抗原）,其它9种O-糖链是两种细胞系中共有的;HepG2与L02相比,t检验结果表明,在检测到的10种O-糖链中发现有5种糖链具有极显著性差异（p<0.01）,2种具有显著性差异（p<0.05）。本研究为进一步探索肝癌中O-的表达特点和及早发现肝癌糖链生物标志物提供参考价值。更多还原